分析PCRmax實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)儀的操作規(guī)程

　　PCRmax實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)儀是指通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)反應(yīng)過(guò)程的儀器。結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行定性和定量分析，計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃度。在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程。

　　PCRmax實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)儀的操作規(guī)程：

　　1、開(kāi)機(jī)：

　　a、依次打開(kāi)電腦顯示器和電腦主機(jī)的電源開(kāi)關(guān)，進(jìn)入Windows界面；

　　b、接著打開(kāi)AB7500儀器電源開(kāi)關(guān)，預(yù)熱10分鐘；

　　c、點(diǎn)擊SDS軟件。

 

　　2、檢測(cè)：

　　a、選擇File-New-新建，在New Document Wizard窗口中，從Assay下拉列表中選擇反應(yīng)類型：相對(duì)定量，定量，等位基因鑒別或陽(yáng)性陰性實(shí)驗(yàn)，從Container下拉列表中選擇反應(yīng)板類型，在Default Plate Name中輸入反應(yīng)板文件名，點(diǎn)擊Next，選擇需要添加到反應(yīng)板文件的探針，點(diǎn)擊Next，為每個(gè)孔探針和任務(wù)，單擊Finish。

　　b、在Well Inspector-View-Well Inspector中輸入樣品名。

　　c、運(yùn)行相應(yīng)的反應(yīng)類型程序，選擇Instrument設(shè)定PCR條件。

　　d、點(diǎn)擊Save下拉菜單下的Save As，輸入文件名，點(diǎn)擊save，關(guān)閉設(shè)置界面。

　　e、按壓儀器托盤(pán)上的按壓位，待托盤(pán)彈出后，將所需檢測(cè)反應(yīng)板放入檢測(cè)孔位，再次按壓托盤(pán)使其滑入儀器，點(diǎn)擊Start開(kāi)始檢測(cè)。

 

　　3、結(jié)果分析：PCR反應(yīng)結(jié)束后自動(dòng)保存結(jié)果，對(duì)擴(kuò)增曲線進(jìn)行分析，選擇Analysis-Analysis Settings 選擇Auto Ct，軟件自動(dòng)為每個(gè)反應(yīng)空生成基線和閾值，也可根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline的Start值、End值，Threshold值，點(diǎn)擊Analyze進(jìn)行再次分析。

　　4、關(guān)機(jī)：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取出反應(yīng)管，順序關(guān)閉AB7500軟件、定量PCR儀電源，關(guān)閉電腦。